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如何做好酶標(biāo)儀的自檢和校準(zhǔn)工作

如何做好酶標(biāo)儀的自檢和校準(zhǔn)工作?酶標(biāo)儀的自檢和校準(zhǔn)從上述所獲的酶標(biāo)儀性能的有關(guān)信息資料,基本上可以說是間接的,有了目標(biāo)以后,如果還想獲得對某一酶標(biāo)儀的感性認(rèn)識,可以對其進行自檢。

如何做好酶標(biāo)儀的自檢和校準(zhǔn)工作?主要有下述幾個方面:

(一)外觀
酶標(biāo)儀上應(yīng)有儀器名稱,型號,編號,生產(chǎn)廠家,出廠日期和電源電壓;各調(diào)節(jié)旋鈕,按鍵和開關(guān)均能正常工作,外表面無明顯機械損傷;顯示文字應(yīng)清楚完整。
(二)酶標(biāo)儀的穩(wěn)定性(漂移)
選用492nm波長,在吸光度o.0A處,測量標(biāo)稱值為1.0A的光譜中性濾光片(測量操作按儀器說明進行),記錄儀器示值或均值,10min后再次記錄儀器示值或均值,前后兩次測量值之差不應(yīng)超過±0.005A。
(三)吸光度測量的準(zhǔn)確度
選用405,492和620nm波長,以空氣為參比,分別測量標(biāo)稱值為0.5和1.0A的光譜中性玻璃濾光片,用專用測試板代替酶標(biāo)板,按儀器說明連續(xù)測量3次,按下式計算準(zhǔn)確度:AA=1/3(A、+A。+A3)—A:(A:為標(biāo)準(zhǔn)值)。
(四)吸光度測量的重復(fù)性
波長選用同(3),在酶標(biāo)板**排加注空白溶液,**排加入濃度為200rig/ml的重鉻酸鉀溶液,重復(fù)測量5次。記錄每次測量的**排吸光度值,取**排任一孔吸光度值與各次對應(yīng)孔吸光度值。按下式計算重復(fù)性:
(五)酶標(biāo)儀的線性
選用540nm波長,將標(biāo)稱值o.5,1.0A中性濾光片分別放入專用測試板樣本位置中,以空氣為參比,各重復(fù)測量3次;然后將以上兩片中性濾光片疊加后置于專用測試板的同一孔位中,重復(fù)測量3次。線性誤差:
式中A1為**片中性濾光片吸光度均值,A:為**片中性濾光片吸光度均值,A1,2為兩片中性濾光片疊加后的吸光度均值。
(六)測量速度的檢定
選用492nm波長,放人96孔酶標(biāo)板進行測量,用秒表計測儀器打印出全部數(shù)據(jù)的時間。
酶標(biāo)儀除了在選購時,應(yīng)盡可能自檢外,在用于中也應(yīng)定期檢定,以保證酶標(biāo)儀測量的有效性。

將重鉻酸鉀固體試劑放人稱量瓶中(去蓋)置于烘箱中,在105±5℃下烘2h后,置于干燥器內(nèi)冷卻30min,在分析天平上準(zhǔn)確稱取o.2829g,置于100ml燒杯中,用o.05mol/L稀硫酸溶解后,移入500ml容量瓶中,以少量o.05mol/L稀硫酸洗燒杯3次,洗液并入容量瓶中,用0.05mol/L稀硫酸稀釋至刻度線,搖勻。


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